HEPES (4-(2-羟乙基)-1-派嗪乙磺酸) 是一种两性离子有机化学缓冲剂，对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L，一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。

  好的缓冲液”如HEPES具有以下特征： 
 

• pKa 值介于 6.0 和 8.0 之间
• 高溶解度
• 膜不透性
• 对生化反应影响有限
• 极低的可见光和紫外光吸收
• 耐化学作用和酶解作用
• 易于制备。

  HEPES广泛应用于多种生物化学反应，并在某些细胞培养基中用作缓冲试剂.

   碳酸氢盐是常用的培养基缓冲系统。 这是由于碳酸氢盐对细胞具有营养作用的优势，尽管在生理 pH 下，其缓冲能力会有所降低。 加入HEPES，在pH 7.2至7.6下为细胞培养基提供了其它缓冲系统。 

   细胞培养基中的HEPES浓度范围为10 mM至25 mM。  

   HEPES 不为细胞供给营养。 只有在细胞培养过程中需要长时间在 CO ₂ 培养箱外处理细胞时，才将其加入培养基，增强缓冲能力。

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