777奇米四色成人影色区 人肝癌细胞（*被HELA污染）

传代方法 ：

复苏步骤：①冻存管从液氮或-80 ℃冰箱中取出放入 PE 手套中，迅速没入 37 ℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以 1min 内全部溶解为宜；②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有 9mL *培养基的离心管内， 1000-1200rpm 离心 5min ，弃去上清液，用 1-2mL *培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有 5-6mL *培养基的 T25 瓶中，放入培养箱培养。
细胞传代：①将旧培养液吸除，PBS 清洗两遍后，加入 1-2mL 胰霉 （ 0.25%Trypsin+0.02%EDTA ）；②镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许胰霉 轻轻吹打细胞层某处，肉眼可见细胞层脱落，即消化完成，否则继续消化），直接吸掉胰霉，加入 5-6mL *培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。③将细胞悬液按 1:2 比例分到新的 T25 瓶中，添加适当的*培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。；④注意培养基 pH 值变化和细胞密度，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%-90% 时，重复传代操作或者冻存。

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