关于糖原PAS染色液(Periodic Acid-Schiff stain,即过碘酸雪夫染色液),以下是一些科普信息:
一、定义与原理
定义:糖原PAS染色液是一种在组织学、病理学等领域广泛使用的特殊染色方法,主要用于检测组织中的糖原及其他多糖物质。
原理:糖原PAS染色法的基本原理是利用高碘酸(一种强氧化剂)将多糖分子中相邻的二醇基氧化成二醛基,然后二醛基与Schiff试剂(一种含有无色品红的溶液)反应生成红色不溶性复合物。这种红色复合物定位于胞浆上,从而显示出组织中的糖原和多糖物质。
二、操作步骤
糖原PAS染色液的操作步骤大致如下:
标本制备:样本通常需要经过固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片等步骤制成组织切片或细胞涂片。
脱蜡至水:如果是石蜡切片,需要先进行脱蜡处理,然后用蒸馏水洗涤。
高碘酸处理:用高碘酸溶液处理切片或涂片,使多糖分子中的二醇基氧化成二醛基。
Schiff试剂染色:将处理过的切片或涂片置于Schiff试剂中染色,使二醛基与Schiff试剂反应生成红色复合物。
苏木素复染:用苏木素对细胞核进行复染,使细胞核呈现蓝色。
脱水、透明、封固:完成染色后,进行常规的脱水、透明和封固处理,制成永久性的组织切片或细胞涂片。
三、染色结果
糖原PAS染色法的染色结果通常为:组织中的糖原和多糖物质呈现紫红色,细胞核呈现蓝色。这种鲜明的颜色对比使得观察结果更加清晰、准确。
四、应用范围
糖原PAS染色法在组织学、病理学等领域具有广泛的应用价值。它不仅可以用于检测组织中的糖原和多糖物质,还可以用于诊断与糖原代谢相关的疾病(如糖原累积病)、心血管疾病(如心肌病变)、糖尿病等。此外,该染色法还可以用于观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中的中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色等。
五、注意事项
高碘酸浓度和氧化时间:高碘酸是一种强氧化剂,使用时需要注意其浓度和氧化时间的控制,以避免过度氧化或不足氧化的情况发生。
染色液的保存:Schiff试剂和无水乙醇等染色液需要妥善保存,避免阳光直射和高温环境,以确保其稳定性和有效性。
操作规范:在进行糖原PAS染色时,需要严格按照操作规范进行,以避免因操作不当导致的染色失败或假阳性、假阴性结果的出现。