羟自由基测定试剂盒原理,羟自由基测定试剂盒说明书
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一、测定原理
Fenton反应是zui常见的产生羟自由基的化学反应,H2O2的量和Fenton反应产生的OH.量成正比,当给予电子受体后,
用griess试剂显色,形成红色物质,其呈色与OH.的多少呈正比关系。
二、试剂组成与配制:(50T/48样)
试剂一:3%H2O2标准品储备液0.5ml×1支,4℃保存3个月。0.03%标准品应用液的配制:3%H2O2标准储备液:蒸馏水=1:99稀释,现用现配。
试剂二:底物储备液1ml×1支,4℃保存3个月。
底物应用液的配制:
若您的样本为产生羟自由基,即测定管吸光度比对照管吸光度低,则底物应用液的配制:底物储备液:蒸馏水=1:99稀释,现用现配。
若您的样本为产生羟自由基,即测定管吸光度比对照管吸光度高,则底物应用液的配制:底物储备液:蒸馏水=1:299稀释,现用现配。
试剂三:甲液储备液2ml×1支,4℃保存3个月,用时加蒸馏水1:9稀释成应用液。
乙液7ml×2支,4℃保存3个月。
试剂三应用液的配制:甲液应用液与乙液等比例混合,用多少配多少,余下4℃保存。
试剂四:液体10ml×1瓶,用时加蒸馏水稀释至100ml,制备成应用液,4℃保存。若有结晶,则放置37℃水浴至全部溶解后再稀释。
试剂五:液体30ml×1瓶,避光4℃冰箱保存.
试剂六:液体30ml×1瓶,避光4℃冰箱保存.
试剂七:分析纯的冰乙酸(冰醋酸)自备。
显色剂的配制:试剂四应用液:试剂五:试剂六:冰乙酸=8:3:3:2,需多少配多少,现用现配。
注:抑制羟自由基的物质如:血清(浆)、各种组织匀浆液、口服液等;
产生羟自由基的物质如:中性白细胞、某些药物、部分植物等。
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