脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒简介
脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)是1982年Barde等首先在猪脑中发现的一种具有神经营养作用的蛋白质。脑源性神经营养因子及其受体在神经系统广泛表达。一种小分子二聚体蛋白质BDNF结构、分布及信号转导BDNF分子单体是由119个氨基酸残基组成的分泌型成熟多肽,蛋白等电点为9.99,相对分子质量为3.5×103,主要由β折叠和无规则卷曲二级结构组成,含有3个二硫键,为一种碱性蛋白质。BDNF分布在中枢神经系统、周围神经系统、内分泌系统、骨和软骨组织等广泛区域内,但主要是在中枢神经系统内表达,其中海马和皮质的含量zui高。
脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒的显色与比色
显色
显色是ELISA试验中zui后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。适当提高温度,有助于加速显色。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。在定量检测中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。ELISA显色结果通过酶标仪进行,可减少实验误差,提高临界值样本的分析准确度。尽量避免肉眼直接判断结果,因为不同个体的视觉存在差异。应注意,加显色剂时,要保持显色剂不外流。加终止液时应避免产生较多气泡,否则可能使假阳性结果的出现概率增加。
比色
比色的方法有目视法和酶标比色法2种。目视法简单明了,但对同一标本,操作者的不同有时会出现不同的结果,具有一定的主观性。比色的结果通常用光密度表达,现按规定用吸光度表达。酶标仪不应安置在阳光或强光照射下,操作时的适宜室温在15℃~30℃之间,使用前要先预热仪器15~30min,使测得结果更为准确。比色前,应先用洁净的吸水纸擦拭干净板底附着的液体,然后将板正确放在酶标比色仪的比色架上。综上所述,的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。在实际应用过程中,操作者必须熟练掌握基本操作技能,对每个环节进行严格仔细的核查,尽量避免假阳性和假阴性反应的出现,保证检测结果真实可靠,为诊断和疾病防治提供可靠的理论依据。
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