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elisa试剂盒操作中的18条军规,你知道么
更新时间:2017-05-04   点击次数:1350次

ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。

  1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。

        2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。

        3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。

        4、实验时,要使底物避光保存。

 

近期,赤峰宝山中医院朱艳萍等研究了ELISA检测mei毒抗体导致老年人产生假阳性的分析,研究发现,年龄与疾病因素是造成TP-ELISA法检测老年人梅毒特异性抗体导致假阳性的重要因素。该文章发表于2016年04期《中国医药指南》上。

        该研究旨在讨论使用酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)检测梅毒抗体致老年人产生假阳性结果的原因。

        研究者们采用酶联免疫吸附试验分别检测450例老年人及1912例中青年患者血清中的梅毒特异性抗体,阳性者再使用已被CDC定为确诊方法的梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)诊断试剂进行复检确诊。

        结果显示,酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)法检测出的老年组的假阳性率明显高于中青年组,两组间具有显著性差异(P<0.05)。

        5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。

        6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。

        7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。

        8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

        9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。

        10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

        11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可保存。

        12、底物是光敏感的,要在临用前现配。

        13、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。

        14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。

        15、待检样品要澄清,否则会影响结果。

        16、温浴时间应遵守试剂盒规定。

        17、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。

        18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。

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