微量蛋白加样缓冲液( 1/6 ×)通常用于 SDS-PAGE ( SDS- 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)等蛋白质分析实验中,以帮助蛋白质样品更好地与凝胶结合并在电泳过程中保持稳定。以下是对微量蛋白加样缓冲液( 1/6 ×)的详细解析:
一、产品特性
浓度: 1/6 ×表示该缓冲液是常规浓度(通常指 6 ×)的六分之一。这种低浓度设计通常用于需要精确控制样品体积和浓度的场合。
主要成分:微量蛋白加样缓冲液通常包含 SDS (十二烷基硫酸钠)、缓冲盐溶液、溴酚蓝指示剂等成分。 SDS 能够与蛋白质结合,形成带负电荷的复合物,从而消除蛋白质间的电荷差异;溴酚蓝则作为指示剂,用于观察蛋白质的迁移情况。
用途:主要用于 SDS-PAGE 电泳中蛋白质样品的上样。它可以帮助蛋白质样品更好地溶解、变性和与凝胶结合,从而提高电泳的分辨率和准确性。
二、使用注意事项
溶解与混匀:在使用前,应确保微量蛋白加样缓冲液完全溶解并混匀。如有必要,可以轻轻摇动容器以促进溶解。
样品处理:将适量的蛋白质样品与缓冲液混合,通常按照一定比例进行(如每 50 微升蛋白样品加入一定量的 1/6 ×缓冲液)。混合后,应进行加热变性处理(如 100 ℃水浴加热 5-10 分钟),以使蛋白质充分变性并释放出 SDS 。
上样与电泳:冷却至室温后,离心去除可能的沉淀物,取上清液进行上样。电泳过程中,应注意控制电压和时间,以确保蛋白质能够充分迁移至凝胶的末端。
三、储存与有效期
储存条件:微量蛋白加样缓冲液通常应在 -20 ℃下保存,以避免变质和降解。在储存过程中,应确保容器密封良好,以防止水分挥发和污染。
有效期:根据生产商的说明,微量蛋白加样缓冲液的有效期通常为 12 个月或更长。然而,具体有效期可能因储存条件、产品批次等因素而有所不同。因此,在使用前应检查产品的有效期标签,并在有效期内使用。
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